Особенности туберкулиновой пробы: что это такое, виды и состав ППД
Туберкулинодиагностика представляет собой использование очищенного и безопасного продукта жизнедеятельности палочки Коха в рамках внутрикожной пробы на туберкулез (тест Манту) и скарификационной накожной туберкулиновой пробы Пирке. Методики призваны определять наличие специфической иммунной реакции организма в ответ на введение туберкулина. Пробы позволяют выявить инфицирование, ранние стадии туберкулеза легких, а также оценить эффективность проводимого лечения.
Оглавление
Что такое ППД (PPD)?
Туберкулин – это очищенное производное белка (PPD – purified protein derivative), продуцируемого возбудителем туберкулеза (микобактерией), инактивированное нагреванием, с последующей ультрафильтрацией и осаждением трихлоруксусной кислотой. Для получения туберкулина используются возбудители бычьего и человеческого туберкулеза.
Для получения очищенного белка в лабораторных условиях на питательных средах выращивают микобактерии. Далее чашки с выросшими колониями палочек Коха погружают в автоклав на полчаса при температуре 121°С. После воздействия высокой температуры бактериальную взвесь фильтруют и концентрируют с помощью ультрафильтрации. Чтобы осадить туберкулин, добавляют трихлоруксусную кислоту, проводят обработку спиртом и высушивают.
Полученный порошок из нескольких серий смешивают и используют в течение 20 лет с целью получения унифицированного результата при туберкулинодиагностике. Каждую серию подвергают тестированию на стерильность, отсутствие способности к сенсибилизации организма человека, отсутствие живых микобактерий, специфическую активность.
Впервые туберкулин был получен Робертом Кохом более века назад, препарат называют старым туберкулином Коха – альттуберкулином. Основным его недостатком является наличие большого количества балластных веществ и продуктов жизнедеятельности микобактерий. Данные компоненты вызывают специфическую реакцию организма, затрудняющую диагностику.
Но в 1941 году выделили туберкулин млекопитающих – PPD-S, а позднее из смеси возбудителей бычьего и человеческого туберкулеза получили PPD-L, применяющийся в современной туберкулинодиагностике. Как национальный стандарт в СССР его приняли в 1963 году.
Используют определенные виды туберкулина ППД-Л, имеющие различные дозировки протеина и цели применения:
- очищенный в стандартном разведении – 0,1 мл содержит 2 туберкулиновые единицы, именно этот туберкулин ППД-Л используется для массовой туберкулинодиагностики при проведении пробы Манту;
- очищенный лиофилизат для индивидуальной диагностики по 50000 туберкулиновых единиц в ампуле. Сухой туберкулин применяется только в противотуберкулезных учреждениях.
Состав лекарственной формы туберкулина, помимо самого протеина в дозе 2 ТЕ, представлен вспомогательными компонентами для сохранения стерильности и предотвращения осаждения протеина: фенолом, твином-80, полисорбатом, гидрофосфатом натрия, дигидрофосфатом калия, натрия хлоридом, водой для инъекций до 0,1 мл. В 1 международной туберкулиновой единице ППД-Л содержится 0,00006 мг вещества. Эта дозировка приводит к развитию положительной реакции у инфицированных лиц.
Протеин выпускают в ампулах по 3 или 5 мл, что равно 30 и 50 дозам соответственно.
Вводят туберкулин внутрикожно или наносят на кожу, в зависимости от поставленной цели в диагностике туберкулеза. Реализуются эти цели в клинической практике посредством пробы Манту и пробы Пирке.
Разновидности теста на туберкулез
Принцип туберкулинодиагностики заключается в определении реакции организма человека на введение туберкулина. Если иммунитет ранее встречался с возбудителем туберкулеза, организм сенсибилизирован, т.е. обладает гиперчувствительностью к компонентам микобактериальной клетки. Бактерия вызывает состояние аллергии замедленного типа, поэтому туберкулиновый тест называют аллергической пробой на туберкулез. Цель – определить наличие именно инфекционной аллергии, свидетельствующей о заражении.
Туберкулин используется для выполнения проб Манту и Пирке. Тест Манту проводится у детей и подростков с частотой раз в год для выявления туберкулеза, а также лиц, входящих в группы риска по заболеванию. К ним относят пациентов с виражом пробы, гиперергической реакцией и с постоянно высоким уровнем реагирования.
Пробу Манту выполняют внутрикожно. Результат подвергается оценке спустя 3 суток. Положительным ответом считают наличие именно уплотнения (папулы) от 5 мм и более, а не покраснения. Папула у взрослых размером более 21 мм считается гиперергической реакцией. Если результат отрицательный, но необходимо провести дифференциальную диагностику туберкулеза и другого заболевания, выполняют тест с дозой 100 ТЕ.
Недостатком туберкулинодиагностики является развитие положительной реакции как при заболевании, так и после вакцинации БЦЖ. Данное явление характерно для привитых детей. Дифференциальная диагностика между инфекционной аллергией и поствакцинальной бывает сложной.
Туберкулиновая проба Пирке – это способ индивидуальной диагностики туберкулезной инфекции. Тест проводят в рамках различения постпрививочной и инфекционной аллергии, для определения порога индивидуальной чувствительности к туберкулину, степени активности туберкулеза и эффективности его лечения.
Проба Пирке в настоящее время используется редко, так как недостаточно стандартизирована. Сухой туберкулин разводят так, чтобы в 1 мл раствора содержалось 100000 туберкулиновых единиц. Далее на предплечье пациента наносят каплю раствора и выполняют скарификацию (царапание кожи). Оценка пробы проводится через 2 суток.
Градуированная проба подразумевает использование высушенного протеина, 100%-го и разведенного до концентраций 25%, 5% и 1%. Выполняется нанесение на кожу по капле каждого из этих растворов и контрольной капли без туберкулина. Эта разновидность теста Пирке необходима для верификации активности процесса и эффективности лечения.
Реакцию оценивают спустя 2 суток и считают положительной при размере папулы 3 мм и более на 100% туберкулин. Положительная реакция на все разведения указывает на активный первичный туберкулез.
Про все анализы на туберкулез написана отдельная статья.
Полезное видео
В видео ниже рассказано, как проводится туберкулинодиагностика и что за препарат используется для пробы:
Источники и справочные материалы
Заключение
Туберкулинодиагностика сохраняет свою актуальность, несмотря на ряд недостатков, обусловленных низкой специфичностью, ложноположительными реакциями. И современные анализы, и тесты старого образца в выявлении туберкулеза не заменяют друг друга, а используются в комплексе.
