Диагностика туберкулеза с помощью ПЦР: что это такое и какие материалы используют?
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это молекулярно-генетическое исследование биологического материала, которое позволяет выявить ДНК возбудителя в образце.
ПЦР диагностика туберкулеза является одним из самых точных методов верификации заболевания. С его помощью можно не только выявить наличие в организме возбудителя, но и определить его типовую принадлежность. Также метод ценен для определения латентных форм болезни.
Данная статья содержит информацию о сути методики, показаниях, подготовке к исследованию и расшифровке результатов.
Оглавление
Показания для диагностики
Несмотря на свои очевидные преимущества (быстрота выполнения, точность) ПЦР анализ крови и других биологических жидкостей не является скрининговым методом. Причина этого – высокая стоимость исследования. Кроме того, некоторые лаборатории не имеют необходимых для проведения теста реактивов и оборудования. Поэтому проводить ПЦР на туберкулез вместо пробы Манту или рентгенографии органов грудной клетки нецелесообразно.
Выделяют следующие показания для проведения исследования:
- длительный контакт с лицом, у которого достоверно выявлен туберкулез;
- беременность;
- аллергические реакции на туберкулин;
- ВИЧ-инфекция или СПИД;
- невозможность верифицировать заболевание другими лабораторными способами (при наличии клинических признаков туберкулеза).
Помимо прочего, исследование помогает дифференцировать туберкулезные и нетуберкулезные микобактерии. Также ПЦР определяет устойчивость возбудителя болезни к различным лекарственным препаратам. В процессе исследования оценивается структура ДНК, определяются мутации, ответственные за возникновение резистентности к лечению.
Материалы, используемые для исследования
Для ПЦР диагностики могут быть использованы любые биологические жидкости.
Чаще всего исследуются:
- кровь;
- слюна;
- мокрота;
- моча;
- спинномозговая жидкость;
- выделения из половых путей;
- промывные воды желудка или бронхов.
Выбор материала зависит от формы заболевания. При подозрении на легочный туберкулез проводится ПЦР-исследование мокроты или крови. Плевральный выпот используют для установления микобактериальной природы плевритов. Для верификации менингита, вызванного палочками Коха, применяют исследование спинномозговой жидкости. При наличии признаков поражения мочеполовой системы проводится ПЦР мочи на туберкулез.
Объем биологической жидкости зависит от ее вида. Крови требуется 8-10 мл. Для исследования мочи необходимо 50-70 мл жидкости. Для анализа мокроты берется от 10 до 20 мл бронхиальных выделений.
Проблемой ПЦР диагностики является большое количество ложноположительных результатов. Это связано с нарушением правил сбора материала и доставки его в лабораторию. Микобактерии распространены повсеместно, поэтому при нарушении санитарных норм возможна контаминация (смешение, загрязнение) образцов флоры.
Материал должен собираться в стерильную тару. Делать это нужно в специальном помещении. Важно исключить контакт контейнера или пробирки с окружающими предметами. Сразу после завершения сбора материала необходимо герметично закрыть емкость и поместить ее в холодильную установку.
Транспортировка образцов осуществляется в течение нескольких часов. Для улучшения условий хранения и доставки допустимо использование консервантов и антикоагулянтов (для крови).
Подробно про анализы крови при туберкулезе написана отдельная статья.
Подготовка пациента
Для получения достоверных данных важна правильная подготовка к исследованию. Анализ крови сдается утром, натощак. Моча также должна быть собрана утром, в стерильный контейнер, после гигиенических процедур.
Для проведения исследования мокроты необходимо достаточное ее количество. Поэтому допустимо назначение отхаркивающих препаратов.
Перед исследованием выделений из половых путей необходимо несколько дней воздерживаться от половых контактов. Недопустимо проведение спринцевания в этот период.
Имеют значение и медикаменты, которые употребляет пациент. Некоторые из них могут исказить результаты анализа. Перед проведением исследования необходимо обсудить правила приема и режим дозирования лекарств с врачом.
Расшифровка результатов теста
Расшифровка результатов ПЦР исследования осуществляется в течение нескольких часов. Обнаружение ДНК возбудителя в материале говорит о наличии инфекции в организме. Однако судить об активности процесса, исходя из этих данных, нельзя (исключение составляет проведение количественной ПЦР).
Если следы микобактерий в образце не обнаруживаются, можно говорить об отсутствии инфекции. В отличии от положительного, отрицательный результат следует считать надежным.
ПЦР анализ расшифровывается автоматически. Это стало возможным благодаря введению в практику ПЦР-анализаторов. С их помощью проводится большое количество исследований в короткие сроки.
Полезное видео
ПЦР: что это такое и как устроено в этом видео:
Источники и справочные материалы
Заключение
На сегодняшний день ПЦР является самым достоверным способом установления инфицирования туберкулезом. Исследование помогает не только выявить заболевание и провести дифференциальную диагностику, но и подобрать эффективную схему лечения. Недостаточная распространенность метода объясняется его дороговизной, необходимостью специфического оснащения и высокой долей ложноположительных результатов.
