Современный метод диагностики туберкулеза — квантифероновый тест: что это такое?
Квантифероновый тест – это современная альтернатива традиционной туберкулинодиагностике, метод, позволяющий достоверно выявить факт инфицирования лиц с аллергией на туберкулин, вакцинированных БЦЖ, а также при сомнительном или положительном диаскинтесте.
Анализ является отличным дополнением к другим диагностическим методикам обнаружения активного туберкулеза. Но, как и другие способы, требует правильной трактовки результатов. Как раз об этом и наша статья.
Оглавление
Что это такое?
Квантифероновый тест на туберкулез представляет собой инновационный анализ для лабораторной диагностики как латентной (бессимптомной), так и активной туберкулезной инфекции. Тест основывается на определении в крови ассоциации инфицированных микобактерией иммунных клеток, которые продуцируют гамма-интерферон – именно количество IFN-γ подлежит выявлению. Поэтому данный тест на туберкулез называется гамма-интерфероновым – interferongamma release assay, или метод IGRA (анализ выброса гамма-интерферона).
При инфицировании микобактерией Т-лимфоциты человека приобретают избыточную чувствительность и продуцируют гамма-интерферон. Этот процесс воспроизводится в пробирке. К антигенам палочки Коха добавляют кровь человека. Если организм знаком с инфекцией, будет вырабатываться IFN-γ. Для определения ИФН-γ применяется иммуноферментный анализ, а для интерпретации теста полученное значение количества интерферона сравнивается с контрольным.
В качестве лабораторных антигенов микобактерий применяют смесь белков ESAT-6, CFP-10 и TB7.7(p4). При этом участки хромосом, кодирующие данные антигены, отсутствуют у микобактерии птичьего туберкулеза, штамма БЦЖ, нетуберкулезных микобактерий. Это объясняет высокую специфичность анализа по сравнению с другими диагностическими пробами, в частности, Манту и диаскинтестом. Методика не дает ложноположительного результата после прививки БЦЖ.
Проведение исследования
Для проведения теста используется венозная кровь, которую забирают в количестве 5 мл, используя 3 пробирки:
- Красная пробирка, в которой находится три антигена микобактерии, вместе с кровью культивируется при 37°С в течение 16-24 часов. Т-лимфоциты крови стимулируются антигенами, и, если они «знакомы» с ними, происходит выработка ИФН-γ.
- Серая пробирка служит контролем – в сыворотке крови определяют исходный уровень ИФН-γ без стимуляции антигенами.
- Фиолетовая пробирка необходима для оценки уровня ИФН-γ в сыворотке крови после инкубации.
Квантифероновый, или тубинфероновый, тест на туберкулез можно сделать в частных лабораториях, например, в «Гемотесте», а также в серологических лабораториях научно-исследовательских институтов.
Показания
Приблизительно 30% населения планеты имеют скрытую туберкулезную инфекцию – это означает, что люди инфицированы микобактериями, но симптомы болезни отсутствуют. Снижение иммунитета приводит к активизации возбудителей туберкулеза, бактериовыделению и распространению палочек Коха среди других людей. Поэтому и участковые терапевты, педиатры, и семейный доктор рекомендуют выполнять квантифероновый тест как скрининговый метод достоверного выявления скрытой формы туберкулеза.
Лица, относящиеся к группе риска среди взрослых:
- медицинские работники;
- люди, контактирующие с больным туберкулезом;
- беременные;
- военнослужащие;
- работники сферы образования;
- лица с ВИЧ-инфекцией;
- пациенты, получающие лучевую, противоопухолевую, кортикостероидную, иммуносупрессивную терапию (т.е. люди с ослабленным иммунитетом);
- пациенты на гемодиализе;
- лица с заболеваниями, ослабляющими иммунитет (вирусные гепатиты, сахарный диабет, опухоли и пр.);
- люди, проживающие или мигрирующие из стран с очень высоким уровнем заболеваемости туберкулезом (регионы Юго-Восточной Азии, Западной части Тихого океана, страны Африки);
- больные профессиональными заболеваниями легких;
- наркоманы;
- лица, прибывшие из мест лишения свободы.
Метод IGRA проводят при сомнительной или положительной пробе Манту, диаскинтеста, а также при вираже туберкулиновых проб. Противопоказание к постановке реакции Манту и диаскинтеста является показанием к проведению квантиферонового теста. Его также выполняют через 6-8 недель после контакта с больным туберкулезом.
Подготовка
Метод диагностики туберкулеза посредством метода IGRA подразумевает применение иммуноферментного анализа, что означает необходимость соблюдения ряда правил. Кровь сдают строго натощак, как минимум за 10 часов до сдачи анализа прием пищи прекращают. Во избежание образования хилезной (насыщенной микрочастицами жира) сыворотки прием жирной пищи прекращают за 12 часов до теста.
Квантифероновый тест можно проводить в период обострения аллергии, после прививки – это не повлияет на уровень гамма-интерферона.
Кровь можно сдавать в любое время суток. Врачи не рекомендуют сдавать анализ при острых инфекциях, несмотря на то, что производитель тест-системы указывает на отсутствие их влияния на результат.
Интерпретация результатов
Возможно три варианта результата теста.
Отрицательный
Такой результат с высокой вероятностью свидетельствует об отсутствии контакта с микобактерией, но не исключает на 100% наличие активного туберкулеза: ложноотрицательный анализ может быть получен в ранние сроки заражения, при выраженном иммунодефиците, у детей до 5 лет.
Сомнительный
Такой результат требует проведения повторного теста через некоторое время (4-5 недель и более). Он означает, что уровень гамма-интерферона не позволяет идентифицировать наличие контакта с палочкой Коха.
Положительный
Квантифероновый тест положительный, когда пациент инфицирован или болен активной формой туберкулеза; делать дополнительную диагностику при этом необходимо. Она включает рентгенографию и КТ, микробиологические исследования, ПЦР, диаскинтест. Ложноположительный результат возможен при инфицировании нетуберкулезными видами бактерий (M. kansasii, M. szulagai, M. marinum).
Преимущества и недостатки
Положительные стороны анализа:
- отсутствие противопоказаний;
- безопасность, отсутствие побочных явлений;
- отсутствие влияния на результат прививки против туберкулеза в анамнезе;
- высокая точность теста к микобактериям, вызывающим именно туберкулез.
Отрицательные стороны:
- положительный результат говорит как об инфицированности, так и об активной форме – требуется дальнейшая диагностика;
- высокая стоимость.
Инфицирование не означает болезнь, в странах постсоветского пространства такой результат часто регистрируется ввиду широкой распространенности туберкулеза.
Сравнение с диаскинтестом и другими методами
Диагностика туберкулеза – довольно сложный процесс, поэтому категорично сказать, что лучше, – проба Манту, диаскинтест или квантифероновый тест – невозможно и неправильно.
Преимуществом реакции Манту является выявление туберкулеза на очень ранней стадии, когда диаскинтест и метод IGRA будут отрицательными. Недостаток туберкулинодиагностики – высокая частота (30-50%) ложноположительных результатов ввиду аллергии и индивидуальных особенностей, а также реагирование на БЦЖ.
Чаще всего диагностическая тактика сводится к тому, что при вираже Манту выполняют диаскинтест и квантифероновый анализ. В случае отрицательного диаскинтеста и положительного IGRA рекомендуют через 6-8 недель пересдать диаскинтест. Если он по-прежнему будет отрицательным, это подтвердит факт инфицирования, а не активной формы болезни, и оправдает положительный квантифероновый анализ. В таком случае профилактическое лечение не назначается.
Сравнение пробы Манту и диаскинтеста подробно рассмотрено в этой статье.
Источники и справочные материалы
Заключение
Квантифероновый тест значительно расширяет возможности диагностики инфицированности микобактериями, а также активного туберкулеза у лиц с различными анамнестическими данными. Однако анализ не является самодостаточным, требуется углубленное клинико-диагностическое обследование при положительном его результате.
